- 品牌:bersee博尔西
- 产地:北京
- 型号:1ml
- 货号:BTR203Q
- 价格: ¥680/支
- 发布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2024-12-07
产地 | 北京 |
品牌 | bersee博尔西 |
货号 | BTR203Q |
用途 | 蛋白纯化等科研实验 |
包装规格 | 1ml |
纯度 | 99% |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
提示:本公司全部产品均为科研、实验专用试剂,非医疗用途、非药品、非食品、非体外诊断试剂,不可用于动物及人体!
蛋白G-琼脂糖凝胶FF
(Protein G Berpharose FF)
1.产品介绍
链球菌G蛋白(Streptococcus Protein G,SPG)是G、C型链球菌细胞壁中的一种蛋白质,能特异性地同免疫球蛋白IgG分子的Fc段结合而不影响其Fab段与抗原分子结合的能力,其亲和填料可以用于从血清、腹水、组织培养物等上清中结合吸附并纯化免疫球蛋白(抗体)。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、25ml、100ml、500ml、1L
3.产品性能
性能 |
指标 |
基质 |
4%琼脂糖微球 |
配基 |
重组蛋白G |
配基密度 |
>6mg/ml |
载量 |
≥30mg 人IgG/ml |
粒径 |
45-165μm |
*耐压 |
0.3Mpa |
推荐流速 |
50-300 cm/h |
pH稳定范围 |
3-10 |
储存缓冲液 |
20%乙醇 |
储存温度 |
4-8℃ |
5.纯化流程
应用举例:
结合缓冲液:20mM磷酸缓冲液、150mMNaCl、pH7.0
洗脱缓冲液:0.1M甘氨酸,PH3.0或0.1M柠檬酸缓冲液,pH 4.0
中和缓冲液:1 M Tris-HCl,pH 8.5
1) 1ml重组蛋白G琼脂糖凝胶预填柱,用5-10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液。
2)用结合缓冲液平衡5-10个柱床体积。
3)将5ml人多抗血清用结合缓冲液稀释至50ml,0.45μm滤膜过滤上样。
4)用结合缓冲液平衡5-10个柱床体积至基线。
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用中和缓冲液调节其pH至中性。
6)每次使用后依次使用3个柱体积的结合缓冲液,5个柱体积的去离子水, 5 个柱体积的 20%的乙醇平衡保存,防止填料被细菌污染。
7) SDS-PAGE电泳分析。
6.注意事项:
1)样品洗脱后一般pH很低,应立刻用碱性中和缓冲液(如1MTris-HCl,pH8.5)将收集到的抗体溶液中和到中性,或在收集容器中事先装5-10%、pH7.5的缓冲液(如1MTris-HCl或1M磷酸缓冲液),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
2)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
3)填料再生清洗:随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量下降,严重影响纯化效果,这时需要对填料进行再生清洗(如下步骤)
去除沉淀或变性物质:用 2 倍柱体积的 6M 盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用 5 倍柱体积的 PBS, pH 7.4 清洗。
去除疏水性吸附造成的非特异性吸附物质:用 3-4 倍柱体积的 70%乙醇或 2 倍柱体积的 1% Triton™ X-100 清洗,然后然后立即用 5倍柱体积的 PBS, pH 7.4 清洗
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Berpharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Berpharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Berpharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Berpharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni- Berpharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Berpharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Berpharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
★肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin- Berpharose FF)
★大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI- Berpharose FF)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Berpharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Berpharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co- Berpharose FF)
人血清白蛋白琼脂糖凝胶FF (HSA- Berpharose FF)
重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-VEGF Berpharose FF)
重组人碱性成纤维细胞生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-bFGF Berpharose FF)